病*性出血性败血症(VHS)最初发现于丹麦叶古都村的虹鳟养殖场。该病是20世纪初至80年代中期,以欧洲为中心流行的淡水鲑科鱼类传染病。随后,在北海、波罗的海以及白令海产的海水鱼类中也分离到了VHS病*(VHSV)。到目前为止,VHSV的宿主已经超过了20多种鱼类。
患VHS的病鱼呈现鱼体色变黑、眼球突出、腹部膨胀、贫血、体侧和鳍条基部出血,肝、肾等脏器出血、肿胀以及褪色,在骨骼肌中有点状出血的症状(图1)。进行病理组织学检查时,可见肾脏等泌尿系统和造血组织坏死,部分肝脏、脾脏坏死以及骨骼肌明显出血。从体长5cm的幼鱼到~g的成鱼均可感染这种疾病。
图1患病鱼的骨骼肌中有点状出血的症状
引起这种疾病的病原是属于弹状病*科粒外弹状病*属的VHSV。为单股负链RNA病*,有囊膜,子弹状,大小为(45~)×(~)nm。最适增殖温度为10~20℃。VHSV感染的细胞,表现为细胞逐渐变圆而出现细胞病变,并从细胞培养瓶底部脱落。
VHSV可分为4种基因型,其中3个基因型分布于欧洲,1个基因型分布于美国西海岸和亚洲的最东部。
对于发病后的养殖池塘,可以采用二氧化氯对养殖水体进行消*。还可以采用防控水生动物病*病的基本措施进行预防。譬如从没有发生该病历史的养殖场引进受精卵、种苗,采用碘制剂消*受精卵以及发眼卵。将受精卵置于经过消*后的孵化槽,用不含病*的净水进行孵化和进行种苗培育。清除水源中的野杂鱼,将幼鱼放置于上游水域中饲养,避免与成鱼和亲鱼混养。另外,世界动物卫生组织(OIE)将VHS列为“需要申报的疫病”。
2.传染性造血器官坏死病(IHN)传染性造血器官坏死病(IHN)是一种发生于鲑科鱼类稚、仔鱼,并能导致高死亡率的病*性疾病。
患病鱼的典型症状为鱼体侧呈线状或V字状出血(图2),由于贫血导致鱼体鳃丝呈白色,也可见线状出血。解剖患病鱼体检查时,可见其肾脏明显贫血。进行病理组织学检查时,可见其肾脏和脾脏造血组织有坏死现象,这也是这种疾病名称的由来。从卵*囊吸收后的鱼苗到3.0g左右的稚鱼死亡率最高。大型稚鱼或这种疾病流行后期的病鱼多见有腹腔积水,大多数患病鱼体呈现出腹部膨大、也有眼球突出的症状。最近也出现成鱼发生这种疾病的病例,成为现在养殖业中需要解决的问题。
图2患病鱼体侧呈线形或V字形出血的典型症状
这种疾病*属于弹状病*科粒外弹状病*属的IHN病*。诊断该病时除使用鲑科鱼类细胞系外,还可使用EPC、FHM等细胞。细胞病变(CPE)是以培养细胞变圆和形成葡萄串样变化为特征。快速诊断这种疾病常用单克隆抗法和RT-PCR法。了解患病史的有效方法是采用ELISA方法检查鱼体中的抗体。
作为控制这种疾病的措施,将发眼卵用聚乙烯吡咯酮碘(有效碘50mg/L,15分钟)消*后,用不含病*的养殖用水进行饲养,这样会有效地防止这种疾病的发生。对于发病后的养殖池塘,可以采用二氧化氯对养殖水体进行消*。
3.传染性胰坏死(IPN)传染性胰坏死是鲑科鱼类稚鱼期的一种病*病。患病鱼呈现出食欲丧失、体色变黑、眼珠突出、腹部膨胀(图3)。除排泄线状黏液便之外,还可见到原地转圈游泳等异常的活动现象。解剖检查时可见幽门垂附近有点状出血,但是,不是所有病例中均能见到这种症状。对病鱼进行病理组织学检查时,可见病变特征为胰腺的广泛性坏死,在其肾脏也可见到坏死现象。发生这种疾病时,依发病时鱼体的大小和饲养水温的不同,发病情况及其受害程度会有很大的不同。鱼体规格越大而且饲养水温越低,病程越容易转为慢性型,其危害程度也有逐渐变小的倾向。
图3患病鱼体色变黑、眼珠突出、腹部膨胀的症状
这种疾病由属于双RNA病*科的IPN病*引起。IPN病*能耐受氯仿、乙醚、pH3及60℃处理30分钟的条件,在饲养水中也能长时间保持*力。虽然对这种病*可以进行血清学分类,存在血清型不同而致病力强弱不同的倾向。但是,也并不存在严格的相关性。分离病*时,经常采用RGT-2以及CHSE-等细胞,受病*感染的细胞呈特征性的丝状细胞萎缩和核浓缩的细胞病变。
大约从20种鱼、贝类中分离到与IPN病*类似的病*。这些病*多数来源于正常的鱼、贝类,对鲑科鱼类没有致病性的居多。其原因是一般将包括IPN病*在内的这些病*统称为水生双RNA病*。
对于发病后的养殖池塘,可以采用二氧化氯对养殖水体进行消*。作为这种疾病的防控措施,因为IPN病*对紫外线的感受性很低。虽然用碘剂对发眼期卵消*被认为是有效的,但是,也有报道指出这种病*可通过侵入受精卵而被传播。不过,通常还是用紫外线和碘制剂对受精卵进行消*。在欧洲和南美开发的注射用亚单位疫苗已进入实用化阶段。
4.病*性旋转病(Viralwhirlingdisease)很早以前就知道稚鱼有旋转游泳现象。在养殖场经常可以见到这样的情况:即养鱼池水面上有一尾到数尾转圈游动的鱼。并且在秋天至冬天可见到成鱼(鱼体重为30.0~.0g)或是横卧于鱼池壁、横躺于池底,或是像树叶一样上下漂游。此现象除了可能有寄生虫感染之外,也有部分鱼是由于畸形所致。但是,出现旋转运动主要还是病*病的特征。
患病稚鱼无外观症状,解剖剖检时也见不到异常变化,在成鱼常见有脊椎骨异常状态(骨扭曲)。在鱼体脑部出现病变的鱼会出现如图4所示一样地旋转游泳。
图4患病鱼体在水面旋转游泳的状态
从游泳异常的病鱼脑中分离到了病*。在病鱼的神经轴索发现有异常变化。分离到的病*在增殖温度、敏感细胞等方面除具有鱼类病*特有的性状之外,还与鸡白血病病*(反转录病*)相似。但是,到目前为止尚未确定该病*的种属。用细胞培养该病*时能形成与IHN病*极为相似的CPE。由于在感染的CHSE-细胞等许多细胞上形成CPE后细胞发生再修复,故在含有病*状态下细胞可繁殖,形成持续感染状态。受到病*感染的鱼体也多为带*状态,显示出无任何异常症状而继续生存。
在出现病鱼的鱼池中,有20%~40%正常鱼被该病*感染。发病时多见IHN病*、EIBS病*混合感染情况,出现混合感染时对鱼类的危害会增大。
对于这种疾病的防控措施,由于从采卵亲鱼的卵巢液中能分离到病*,因此有必要彻底消*鱼卵。对发病后的养殖池塘,可以采用二氧化氯对养殖水体进行消*。对各种消*药、紫外线以及臭氧的敏感性方面,这种疾病*与IHN相同,甚至比IHN稍敏感。因此,以往对IHN的防制对策对这种疾病也是有效的。
华中农业大学水产学院陈昌福
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